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植物组织培养(plant tissue culture)

在无菌条件下,将外植体(植物器官、组织、花药、花粉、体细胞甚至原生质体)接种到人工配制的培养基上培育成植株的技术。

理论基础

植物细胞的全能性(植物的每个细胞都包含着该物种的全部遗传信息,从而具备发育成完整植株的遗传能力。在适宜条件下,任何一个细胞都可以发育成一个新个体。)

组织培养的基本过程

胡萝卜组织培养示意简图

脱分化

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指将已分化的植物器官、组织或细胞恢复具有分裂能力细胞群(愈伤组织,callus)的过程

愈伤组织:细胞特点分裂快、结构疏松、颜色浅而透明

再分化

使脱分化形成的愈伤组织细胞分化为胚状体(embryoid),或直接形成完整植株的过程。

芽与根形成

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植物组织培养的技术条件

培养基的配制、无菌条件和培养条件

A. 培养基的配制

是植物组织培养的关键步骤。各种培养基的配方有所不同组织和细胞培养技术,但主要成分是相同的:

1.水分

2.矿质元素(包括必需元素和非必需元素)

3.碳源(蔗糖/葡萄糖)

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4. 植物生长调节物质

5. 维生素:vit B1(硫胺素)是必需的,而烟酸、B6(吡哆醇)和肌醇(环己六醇)不是必需的,但对生长有促进作用,一般也添加到培养基中。

6. 有些培养基还具有有机附加物(包括氨基酸、酵母汁及椰子乳等),以促进细胞分化;

最后,将培养基的pH值调节到适当水平。

常用的培养基:

MS培养基:使用最广泛的培养基;

N6培养基:用于水稻花粉培养的培养基;

… …

B. 无菌条件

培养的整个过程中都必须保持严格的无菌条件。

外植体的消毒可采用氯化汞、次氯酸钠等 培养基和接种用具必须进行高温高压灭菌 接种场所需用紫外线照射及用酒精擦拭 培养室也要尽量保持无菌状态。

C. 培养条件

主要指光照和温度组织和细胞培养技术,都可由电脑进行自动控制。

植物组织培养在生产实践上的应用

1. 植物体的无性快繁及脱毒

优点:取材少,培养材料经济;人为控制条件,不受自然条件的影响;生长周期短,繁殖率高;管理方便,便于自动化控制等。

2. 花粉培养和单倍体育种

加速育种进程

3. 培育人工种子

将植物组织培养中产生的体细胞胚包裹在含有养分的胶囊内,可象种子一样直接播种到大田用于生产,即所谓的人工种子(artificial seed)。

4. 药用植物的工厂化生产

如从人参的愈伤细胞中提取人参皂甙;三分三(Scopolia acutangula)愈伤组织中提取莨菪碱等。

5. 原生质体培养和体细胞杂交

获得新品系、新品种(细胞杂交比有性杂交可得到更多的不同类型)或研究生命活动机理等

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