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一株珍贵的植株在短时间内需要大量繁殖,可以采用哪些方法?很多人想到的是种子繁殖、压条、嫁接或者直接扦插。但如果不能获得大量的种子、无法进行大量的压条、嫁接、扦插,那怎么办呢?
解决这一问题的方法就是今天我们要介绍的植物组织培养技术。
植物组织培养有什么神奇之处呢,下图我们可以看出利用兰花的部分叶片经过几个阶段的培养最终可以培养出大量新的完整的兰花植株出来。这也就是为什么目前植物组织培养技术被广泛大量应用于各种珍贵植物培养的的原因。
一、植物组织培养技术
植物组织培养:指在人工培养基上,离体培养植物的器官、组织、细胞和原生质体,并使其生长、增殖、分化以及再生植株的技术。
植物组织培养的原理:是植物细胞具有全能性,即生物体的细胞,具有使后代细胞形成完整个体的能力。
植物组织培养车间
二、植物组织培养步骤 (以铁皮石斛为例)
我以铁皮石斛为例介绍植物组织培养步骤,铁皮石斛又被称为九大仙草之首,是一味名贵的药材。
1、培养基的选择
MS培养基其特点是无机盐和离子浓度较高,是较稳定的离子平衡溶液,它的硝酸盐含量高,其养分的数量和比例合适,能满足植物细胞的营养和生理需要,因而适用范围比较广,多数植物组织培养快速繁殖用它作为培养基的基本培养基。
MS培养基成分及比例
具体的培养基的制备我给大家列举几个,实际培养还需进行调整优化。
基本培养基:MS培养基
(1)诱导培养基:MS+NAA 0.1~0.5 mg/L+BA 0.5~2.0 mg/L;
(2)增殖培养基:MS+3.0 mg/L BA+1.0 mg/L NAA+1.0 mg/L KT;
(3)生根培养基:1/2MS+IBA0.1 mg/L
2、外植体选择
通常铁皮石斛采用种子或茎段为外植体。植物组织培养外植体通常选择生长健壮的无病虫的植株上正常的器官或组织,其中靠近植株的近基部更易培养成功,因为它代谢旺盛,再生能力强。
3、无菌接种
将上述处理完成后的外植体材料带到无菌室超净工作台上,进行二次消毒灭菌: 将茎段腋芽的苞叶拨去。无菌接种操作要需要在专门的设备上完成,保证操作过程全程无菌。因此,网上有人认为植物组织培养投入小的说法是有误的,植物组织培养一般都是规模化生产,基础设施和设备的投入至少需要 近百万。无菌操作具体可以分成:接种前的准备和接种两步骤。
外植体消毒的基本步骤
接种前的准备
接种前对超净工作台和用具消毒
接种
外植体接种的基本步骤
接种结束,清理和关闭超净工作台。
4、扩大培养
外植体接种在试管内的营养物质上,营养物质叫培养基,培养基种类有很多种,不同阶段的培养基是不同的。经过一段时间后诱导分化出多个丛芽状试管苗,把丛芽状试管苗再进行分切诱导,每个芽苗又可以分生出更多的芽苗组织和细胞培养技术,这些芽苗经过继代培育,单一芽苗继续分生出更多个芽苗,反复增殖,在短时间内就可以得到大量无根的芽苗。把这些无根芽苗植入育苗培养基中促使芽苗生根,就得到大量完整的植株小苗。
扩大培养的过程
为了更好的理解扩大培养的过程和原理组织和细胞培养技术,需要进一步了解脱分化和再分化这两个过程,而脱分化形成的愈伤组织没有特定结构与功能,处于旺盛分裂状态,是进一步形成其他器官的基础。
植物组织培养过程
5、移栽(野化)
选择3-5cm高的幼苗;室内炼苗7-10天;洗净幼苗根部的培养基。
铁皮石斛野化的过程可以在大棚,可以绑在树上(一般选择龙眼树等树皮有明显皴裂的树种),也可以直接在林下或者石壁上固定培养。一般野化半年左右有效成分基本可以和野生的铁皮石斛等同。
最后大家可以思考一下:如何找出某一植物的最优组织培养方案?植物组织培养的应用范围?
欢迎留言讨论。
本期关于植物组织培养的知识就介绍到这边了,更多内容,敬请期待,欢迎关注。
本文由2218329273于2023-02-11发表在龙哥云资源网,如有疑问,请联系我们。本文链接:https://longgeyun.com/knowledge/60265.html
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